Por acção de enzimas especificas, as duas cadeia separam-se uma da outra em locais especificos ao longo da molécula, havendo ruptura das ligações hifrogénio.
Cada uma das cadeias originais serve de molde à formação de uma cadeia complementar, sendo utilizados nucleótidos que existem no meio.
De acordo com a regra de complementaridade das bases, formam-se duas novas cadeia de desonxirribonucléotidos. Estas novas cadeia são completares das cadeias originais, sendo cada uma antiparalela a relação à aquela à que lhe serve de molde.
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